مشخصات پژوهش

صفحه نخست /جداسازی، خالص سازی و شناسایی ...
عنوان جداسازی، خالص سازی و شناسایی گونه های باکتری آزوسپریلوم از ریشه های ارقام عمده گندم در شهر اراک
نوع پژوهش طرح پژوهشی خاتمه‌یافته
کلیدواژه‌ها آزوسپیرویلوم، برازیلنس، لیپوفروم، محیط کشت NFB، محیط کشت BMS
چکیده از هفت منطقه از زمین های زراعی کشت گندم در اطراف شهر اراک، ریشه های گندم همراه با خاک اطراف به آزمایشگاه منتقل کرده و به آرامی در داخل ظرف بزرگی با آب مقطر شسته و به مدت 30 دقیقه در هیپوکلریت سدیم استریل نموده و سپس شستشوی مکرر ریشه ها با آب مقطر انجام شد ریشه ها در ناحیه تار کشنده به قطعاتی دزر حد مبلی متر بریده شدندو توسط کاردک استریل جدا شدند. توسط یک پنس استریل قطعات به ته لوله های استریل شده و همزمان فشرده شدندتا باکتری ها از بخش های درونی ریشه آزاد شوند و به هریک لوله های فوق محیط کشت نیمه جامد NFB(Nitrogen Free Basic) اضافه شدو درب لوله ها را بسته و در گرمخانه با دمای 32 درجه قرار داده شد و بعد از 72-48 ساعت لوله های که رگ سفید تشکیل داده بودند(نشانه مثبت در جداسازی به شمار می رود). سپس مقدار کمی باکتری ها را از محل رگه بر روی پلیت حاوی محیط جامد و اصلاح شده NFB کشت داده شدند. پس از یک هفته انکوباسیون در 35 درجه سانتی گراداز کلنی های سفید و متراکم و منفرد حاصل، لام تهیه و رنگ آمیزی گرم انجام شد. برای خالص سازی نهایی و شناسایی دقیق تر باکتری ها به محیط کشت جامد BMS منتقل شدند و بعد از 6 روز انکوباسیون در برخی پلیت ها کلنی های صورتی در برابر نور مشاهده شد. تشکیل کلنی های صورتی تایید قطعی برای شناسایی و جداسازی آزوسپیریلوم تلقی می شود. برایز تشخیص آزوسپیریلوم برازیلنس از سایر گونه ها با استفاده از آزمایشات تکمیلی، تفاوت های مرفولوژیکی و محیط های افتراقی و انتخابی و به طور کلی آزمایشات نیازمندی به بیوتین، تشکیل اشکال پائو مورفیک، رشد در محیط گلوکز و اسیدیز کردن محیط پپتون بعد از 96 ساعت منفی گردید. که در این تحقیق ما بر این اساس موفق شدیم : -در دو منطقه از مناطق مورد مطالعه آزوسپیریلوم برازیلنس را شناسایی و جداسازی نماییم که اکثر واکنش ها و آزمایشات شبیه به آزوسپیریلو برازیلنس SP7 بود. -همچنین در دو منطقه آزوسپیریلوم لیپوفروم شناسایی و جداسازی شدند. - در دو منطقه هیچ باکتری آزوسپیریلومی شناسایی و جداسازی نشد. - منطقه باقی مانده باکتری هایی که شناسایی شد به نظر می رسید سویه هایی از آزوسپیرویلوم برازیلنش باشد.
پژوهشگران محمدرضا امیرجانی (بازنشسته) (همکار)، ابوالفضل تقوی (مجری)