هدف از انجام این مطالعه بررسی اثر افزودن اتانول به رقیق کننده بر کیفیت اسپرم گاو بعد از انجماد و یخ گشایی بوده است.در مجموع تعداد 24 انزال از چهار گاو نر (شش انزال از هر گاو طی سه هفته) جمع آوری شد. در هر تکرار، نمونه های منی با هم مخلوط و سپس به دو قسمت مساوی تقسیم شده و هریک با یکی از رقیق کننده های حاوی تیمارهای آزمایشی رقیق و منجمد شدند. تیمارهای مورد استفاده در این مطالعه شامل: 1) رقیق کننده فاقد اتانول به عنوان گروه شاهد (C) و 2) رقیق کننده حاوی 0/25 درصد اتانول (E) بود. پس از یخ گشایی نمونه ها، فراسنجه های کیفی اسپرم شامل جنبایی، یکپارچگی و عملکرد غشای پلاسمایی، وضعیت زنده مانی و فعالیت میتوکندری مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج آزمایش حاضر نشان داد که اسپرم های گروه شاهد نسبت به اسپرم های گروه اتانول دارای جنبایی کل بالاتر (2/49±76/17 در مقابل 1/96±68/50) و میزان آپوپتوزیس کم تری (0/36±10/56 در مقابل 0/33±13/13) بودند (0/05>p). هم چنین، در سایر فراسنجه های کیفی اسپرم شامل یکپارچگی و عملکرد غشای پلاسمایی اسپرم و فعالیت میتوکندری، تفاوتی بین دو گروه شاهد و اتانول مشاهده نشد (0/05>p). نتایج این مطالعه نشان می دهد که اتانول می تواند اثر منفی بر فراسنجه های اسپرم گاو بعد از انجماد و یخ گشایی بگذارد.